目的：研究鳖甲煎丸对荷瘤小鼠抑瘤作用及胸腺指数、脾指数的影响。方法：分设鳖甲煎丸高、低剂量组对H22荷瘤小鼠连续15天灌胃给药后，测其抑瘤率及胸腺指数、脾指数，与环磷酰胺组比较。结果：鳖甲煎丸有较好的抑瘤作用，高剂量组达到31.8％。鳖甲煎丸对H22荷瘤小鼠的胸腺、脾脏有保护作用。结论：鳖甲煎丸在抗肿瘤方面具有广阔的前景。

[关键词] 鳖甲煎丸；H22荷瘤小鼠；抑瘤率；胸腺指数；脾指数

 

经方鳖甲煎丸为医圣张仲景所创，原用于治疗“癥瘕”、“疟母”病证。由于该方具有寒热并用、攻补兼施、行气化瘀、软坚散结之功，目前广泛应用于肝癌、胃癌及卵巢囊肿等疾病。但因该方用药味数多，许多药物临床罕用，且制剂独特，所以对该方的研究仅限于临床病案报道。缺乏现代科学依据，势必妨碍其进一步推广运用。故笔者通过对该方的实验研究，旨在阐明鳖甲煎丸的抗肿瘤作用，探讨其抗肿瘤机制，为其临床应用提供现代科学依据。

1          材料

1.1  药物  鳖甲煎丸，杭州胡庆余堂有限公司，批号020602。环磷酰胺，江苏恒瑞医药股份有限公司，批号02071121。

1.2  动物及瘤株  昆明种小鼠，购于广州中医药大学动物中心，纯雄性，18～22g。 H22小鼠肝癌，购于中山医科大学肿瘤研究所。

2          实验方法 

2.1  鳖甲煎丸药液的制备  用蒸馏水将鳖甲煎丸分别配成每毫升含0.048g 、0.024g生药的高、低两个剂量组的悬浊液，4℃冰箱保存，用时摇匀。

2.2  肿瘤模型  选择接种瘤细胞后10ｄ的小鼠颈椎脱臼处死，固定于蜡板上，无菌抽取乳白色腹水液，以0.9%氯化钠溶液1：1稀释，经0.2％台盼兰染色后计算活细胞数>95%，调整瘤细胞悬液浓度为6×10⁶/ ｍｌ个瘤细胞，每只小鼠右后肢皮下接种0.2ml。24小时后用药。

2.3  分组  将荷瘤小鼠随机分成4组，每组11只。即：鳖甲煎丸高剂量组、鳖甲煎丸低剂量组、阴性对照组及环磷酰胺组。

2.4  给药  鳖甲煎丸高、低剂量组分别按12g/kg.d^-1、6g/kg.d^-1灌胃，阴性对照组给相同剂量的蒸馏水灌胃，环磷酰胺组按20mg/kg.d^－1腹腔注射。连续用药15天后停药处死，称取瘤重。

2.5 取材  处死小鼠后剥离瘤块用滤纸吸干后称重；取出小鼠脾脏和胸腺，用滤纸吸干后称重。

2.6 评定指标（1）肿瘤抑制百分率（抑瘤率）：抑瘤率（％）＝ （2）比较各组小鼠实验前后体重的变化情况；（3）胸腺指数、脾指数：其测量方法同文献^[1]。

2.7 统计学方法 用SPSS11.0统计软件做单向方差分析。

3         结果

3.1 鳖甲煎丸对H22移植性肿瘤的抑制作用  如表1所示，鳖甲煎丸高剂量组和鳖甲煎丸低剂量组的抑瘤率与阴性对照组均有显著性差异（p﹤0.01）；鳖甲煎丸高剂量组与鳖甲煎丸低剂量组的抑瘤率间亦有显著性差异（p﹤0.05）；鳖甲煎丸高剂量组与环磷酰胺组比较其抑瘤率无显著性差异（p>0.05）。

表1鳖甲煎丸对H22移植性肿瘤的抑制作用（ ）

与阴性对照组比较：﹡p﹤0.01

与鳖甲煎丸低剂量组比较： △p﹤0.05 △△p﹤0.01

3.2荷瘤小鼠在实验前后的体重变化 用药前各组小鼠体重无显著性差异（p>0.05）；用药后与环磷酰胺组比较，阴性对照组、鳖甲煎丸高剂量组、鳖甲煎丸低剂量组的小鼠体重均有显著增加（p﹤0.01）；阴性对照组、鳖甲煎丸高剂量组与鳖甲煎丸低剂量组比较，亦有显著性差异（p﹤0.01）；鳖甲煎丸高剂量组与阴性对照组比较无显著性差异（p>0.05）。见表3。

表2荷瘤小鼠在实验前后的体重变化（ ）

与环磷酰胺组比较： △p﹤0.05 * p﹤0.01

与鳖甲煎丸低剂量组比较：▲ p﹤0.01

3.3 鳖甲煎丸对荷瘤小鼠胸腺指数和脾指数的影响 与环磷酰胺组相比，鳖甲煎丸高剂量组、鳖甲煎丸低剂量组对荷瘤小鼠胸腺指数和脾指数均有显著性提高；鳖甲煎丸高剂量组、鳖甲煎丸低剂量组与阴性对照组的胸腺指数、脾指数相比无显著性差异（p>0.05）；对胸腺指数的提高来讲，鳖甲煎丸高剂量组比鳖甲煎丸低剂量组有显著性差异（p﹤0.05）。如表3所示。

表3鳖甲煎丸对荷瘤小鼠胸腺指数和脾指数的影响（ ）

与环磷酰胺组比较：△p﹤0.05 * p﹤0.01

与鳖甲煎丸低剂量组比较：△△p﹤0.05

4         讨论

鳖甲煎丸是经典的抗肿瘤方，其广泛的应用于临床。但有关其实验研究、机理探讨方面的报道不多。本实验通过用环磷酰胺作为阳性对照药，来阐明鳖甲煎丸的抗肿瘤效果。环磷酰胺是临床常用的化疗药，其能有效地杀伤癌细胞（本实验其抑瘤率达到34.3％），但与此同时也对人体产生不同程度的毒副作用其中主要有骨髓抑制、免疫功能低下和白细胞减少症^[2]。药效方面，鳖甲煎丸高剂量组抑瘤率达到31.8%，鳖甲煎丸低剂量组亦达到20.8％。鳖甲煎丸高剂量组平均瘤重与环磷酰胺组平均瘤重无显著性差异，其与低剂量组平均瘤重存在显著性差异（p﹤0.05）。这说明鳖甲煎丸在抗肿瘤方面疗效显著，并且存在着量效关系。本实验还通过实验前后各组体重变化以及胸腺指数、脾指数的比较，说明了环磷酰胺的毒副作用；同时提示鳖甲煎丸对小鼠免疫器官无损害作用，显示了鳖甲煎丸抗肿瘤的优越性，体现了中医药理论上的整体观念。

鳖甲煎丸的抗肿瘤机理可能是通过促进宿主免疫功能来实现的。本实验也显示了鳖甲煎丸能增加荷瘤小鼠胸腺和脾脏的重量。总之，鳖甲煎丸既能有效抑制肿瘤的生长又能提高宿主免疫功能从而达到攻邪扶正之效，其有广阔的抗肿瘤前景。