胃癌分子靶向治疗的现状与进展

世界华人消化杂志 2007年9月8日;15(25): 2672-2678

吕 伟, 陈 凛吕伟, 陈凛, 中国人民解放军总医院普通外科 北京市 100853
通讯作者: 陈凛, 100853, 北京市复兴路28号, 中国人民解放军总医院普通外科

Current status and recent developments in molecular targeted therapy against gastric cancer

Wei Lv, Lin Chen

Wei Lv, Lin Chen, Department of General Surgery, General Hospital of Chinese PLA, Beijing 100853, China
Correspondence to: Professor Lin Chen, Department of General Surgery, General Hospital of Chinese PLA, 28 Fuxing Road, Beijing 100853, China. chenlinbj@vip.sina.com
Received: 2007-04-12 Revised: 2007-09-27

Abstract
Gastric cancer (GC) is one of the most common malignancies of the digestive system and is a major cause of cancer death in China. Recent improvements in both surgical techniques and adjuvant/neoadjuvant chemotherapy, radiotherapy or both have increased the survival rate of patients with early-stage disease. However, most patients with GC have advanced disease at diagnosis. Thus, despite recent advances, these patients still do poorly. Understanding the molecular pathways that characterize cell growth, cell cycle, apoptosis, angiogenesis and invasion has enabled us to use new approaches to treat this disease in clinical situations. These therapeutic strategies include epidermal growth factor receptor inhibitors, angiogenesis inhibitors, cell cycle inhibitors, apoptosis promoters and matrix metalloproteinase inhibitors. This review presents a brief introduction to the current status and advancement of molecular targeted therapies in the treatment of GC.

Key Words: Gastric cancer; Molecular targeted therapy

Lv W, Chen L. Current status and recent developments in the molecular targeted therapy against gastric cancer. Shijie Huaren Xiaohua Zazhi 2007; 15(25): 2672-2678

摘要
胃癌是对人类健康危害极大的常见恶性肿瘤, 大部分患者就诊时已进入进展期. 我国胃癌的年死亡率在各种恶性肿瘤中占首位. 随着外科手术技术的提高、传统放化疗技术的进步以及新辅助疗法的实施, 早期胃癌术后5 a生存率可达95%以上; 而进展期胃癌疗效仍不理想, 术后5 a生存率仅有30%-40%. 随着胃癌分子生物学研究的不断深入, 针对肿瘤细胞生长、凋亡、细胞周期、侵袭浸润以及血管生成等分子生物靶点提出的分子靶向治疗成为胃癌综合治疗的重点和热点. 这些策略主要包括: 表皮生长因子受体靶向治疗, 细胞周期抑制剂, 细胞凋亡促进剂, 血管生成抑制剂, 基质金属蛋白酶抑制剂等. 本文收集国内外近期文献就胃癌分子靶向治疗的现状与进展进行综述.

关键词: 胃癌; 分子靶向治疗


0  引言
胃癌是消化系统最常见的恶性肿瘤, 但因缺乏特异性的初筛指标以及早期患者症状不明显, 大多数患者在就诊时已经处于进展期. 传统手术根治及放化疗对进展期胃癌的疗效仍不理想, 局部复发和远处转移是影响术后5 a生存率的主要原因. 世界范围内, 每年胃癌死亡人数占肿瘤死亡人数的第2位^[1]. 我国胃癌每10万人口的年死亡率为25.21, 在各种恶性肿瘤中占首位. 随着对胃癌发生、发展和转移过程中分子生物学机制研究的不断深入, 表皮生长因子受体抑制剂(EGFR inhibitors), 细胞周期抑制剂(cell cycle inhibitors), 细胞凋亡促进剂(apoptosis promoters), 基质金属蛋白酶抑制剂(matrix metalloproteinase inhibitors), 抗血管生成因子(angiogenesis inhibitors)等多种特异的分子生物靶向治疗手段在胃癌综合治疗中取得了较大进展.

1  表皮生长因子受体靶向治疗
表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor, EGFR)是一种多功能糖蛋白的跨膜受体, 是酪氨酸激酶生长因子受体家族的一个成员, 与特异性配体如表皮生长因子(EGF)、转化生长因子α(TGFα)、双向调节蛋白(AR)、β-细胞素(BTC)等结合, 通过相应酪氨酸激酶的自身磷酸化作用激活受体. 从而激发细胞内的多条信号转导通路如MAPK、PI3K、c-Src等促进肿瘤细胞分裂、迁徙以及促进肿瘤新生血管形成^[2-4]. EGFR在相当一部分肿瘤中都有不同程度的激活表达, 如胃癌、结直肠癌、头颈鳞癌、胰腺癌、肺癌、乳腺癌、肾癌和脑胶质母细胞瘤等^[5-8]. 因此, 选择其特定部位作为靶点, 通过干扰EGFR信号传导, 来达到抑制肿瘤的增殖、浸润和远处转移的目的, 为胃癌分子靶向治疗提供了新的思路^[9-10].
1.1 表皮生长因子受体酪氨酸激酶抑制剂(EGFR-TKI, epidermal growth factor receptor tyrosine kinase inhibitor) 代表药物有吉非替尼(gefitinib Iressa)、埃罗替尼(erlotinib, Tarceva)、拉帕替尼(Lapatinib)等. 吉非替尼是第一个被FDA批准的强有力的EGFR酪氨酸激酶抑制剂, 2005年在我国上市. Doi et al^[11]采用吉非替尼每天250 mg或500 mg po治疗75例进展期胃癌患者, 28 d后报告12例患者病情稳定(SD), 1例部分缓解(PR), 肿瘤平均进展时间(median time to progression, mTTP)1.2 mo, 平均总生存时间(median overall survival, mOS)3.5 mo. 另一项使用吉非替尼每天250 mg po治疗贲门癌和食管癌的Ⅱ期临床研究报告: 患者中位缓解期(mean duration)4.6 mo, 临床总有效率达30%^[12]. Rojo et al^[13]进一步对胃癌病理组织动态观察研究发现, 使用吉非替尼后EGFR的磷酸化状态显著下降, 通过检测增殖性核抗原Ki-67的表达发现细胞增殖受到明显抑制.
1.2 抗EGFR单抗(Anti-EGFR monoclonal antibodies) 代表药物如西妥昔单抗(cetuximab, Erbitux)、EMD72 000单抗等. 西妥昔单抗是IgG1嵌合mAb, 对EGFR具有高度的亲和力和特异性, 能阻止EGFR与其天然配体结合, 打断细胞自泌性无限增殖的恶性循环, 抑制肿瘤细胞增殖, 诱导细胞凋亡, 2006年在我国上市. Suntharalingam et al^[14]于2006年在ASCO年会上报告采用西妥昔单抗治疗胃癌和食管癌的Ⅰ期临床研究. 37例患者入组, 第1周400 mg/m², 以后250 mg/m²·wk, 连用5 wk, 联合紫杉醇50 mg/m²·wk, 卡铂(AUC为6)连续6 wk, 同时给予50.4 Gy放疗. 30例完成临床试验, 其中67%的患者达到临床完全缓解(clinical complete response). 43%的患者达到病理完全缓解(pathologic complete response), 主要副作用包括脱水、食管炎、皮疹．这个试验的初步结果显示化疗联合抗EGFR靶向治疗对胃癌和食管癌有良好的抗肿瘤活性．
1.3 抗HER-2单抗(Anti-HER-2 monoclonal antibodies) 代表药物为曲妥珠单抗(trastuzumab, Herceptin), 帕妥珠单抗(pertuzumab, Omnitarg). EGFR与同属于erbB家族成员的HER-2能形成异二聚体, 被HER-2激酶激活磷酸化可启动信号转导增强细胞恶性转化和促进肿瘤进展. 曲妥珠单抗是1998年美国FDA批准上市的第一种重组DNA衍生的人源化mAb, 通过与HER2受体特异性结合影响生长信号的传递, 他还可以下调血管内皮生长因子和其他血管生长因子活性. 2002年进入我国市场, 商品名为“赫赛汀”. 帕妥珠单抗为第二代重组人源化单克隆抗HER-2抗体, 与HER-2受体胞外Ⅱ结合域结合阻止与其他HER-2受体之间的二聚化^[15]. 有学者运用显色原位杂交技术(chromogenic in situ hybridization)检测131例胃癌组织标本和100例贲门癌组织标本, 结果16例(12.2%)胃癌标本和24例(24%)贲门癌标本HER-2/neu过度表达^[16]. 另一项研究报告HER-2/neu过度表达的胃癌患者5 a生存率明显低于对照组(21.4% vs 63.0%; P<0.05)^[17]. Matsui et al^[18]通过体内、体外试验证明, 抗HER-2 mAb能有效抑制HER-2阳性胃癌细胞裸鼠荷瘤模型的肿瘤生长. 因此采用抗HER-2的mAb封闭HER-2信号通路可能是一个有效治疗HER-2阳性胃癌的新途径.

2  细胞周期抑制剂
细胞周期蛋白依赖激酶(cyclin-dependent kinase, CDKs)是调控细胞周期的一个蛋白家族, 其主要成员CDK1-CDK7与相应的调节亚基(细胞周期蛋白cyclin)结合组成的复合物是细胞周期的主要调节者, 在细胞分裂增殖的调控中处于核心地位. 研究表明, 大多数人类肿瘤的发生、发展与CDKs/cyclins的过度表达或内源性抑制因子表达下降以及pRb基因的突变有关^[19-21]. 有效地抑制CDKs的催化活性可以对恶性肿瘤的增殖起到积极的治疗作用, 目前对CDKs小分子抑制剂的筛选与研究也是胃癌靶向治疗的研究热点.
         Flavopiridol及其衍生物是一类发展较快, 最早进入临床并取得一定疗效的CDKs小分子抑制剂. Flavopiridol是一种半合成黄酮类化合物, 通过干扰CDK2的ATP结构域来抑制几乎所有CDKs激酶活性(主要包括CDK1、CDK2、CDK4、CDK6), 进而减少cyclin D1 mRNA转录导致细胞停滞在G1期并抑制G1期至S期的转化, 从而达到抑制细胞增殖的目的^[22-23]. 此外, Flavopiridol在极低浓度下可抑制VEGF的生成, 降低VEGF mRNA稳定性,下调VEGF蛋白水平从而发挥抗血管生成作用^[24]. Thomas et al^[25]在一项Ⅰ期临床研究中采用flavopiridol 40 mg/m²·d , 持续滴注3 d, 每2周重复方案治疗晚期肿瘤患者38例, 其中有远处转移的进展期胃癌患者1例得到了CR, 无病生存时间超过48 mo, 主要副反应包括腹泻、体位性低血压, 个别患者出现癌性疼痛加重. 此外, Motwani et al^[26]报道Flavopiridol还可以加强多西紫衫醇对胃癌MKN-74细胞系荷瘤模型肿瘤生长的抑制作用. 目前临床主要采用Flavopiridol联合标准化疗方案的方法来提高疗效^[27].

3  细胞凋亡促进剂
NF-κB是在B细胞免疫球蛋白的κ轻链上被发现的, 是一种作用广泛的转录因子, 属于NF-κB/Rel蛋白家族成员, 参与细胞的生长、黏附、炎症反应和分化. 进一步研究发现, 在人类多种恶性肿瘤中, NF-κB发挥促存活(prosurvival)和抗凋亡作用(anti-apoptotic)^[28-29]. 此外, 作为幽门螺杆菌(helicobacter pylori, Hp)感染导致胃癌的一个重要因素, NF-κB活化可能在这过程中起到了桥梁作用^[30-32]. 临床研究也发现NF-κB的表达与胃癌的恶性程度呈正相关而与预后呈负相关^[33]. 典型的NF-κB是由P65和P50 2个亚基组成, 在胞质中通过与其抑制蛋白-IκB家族紧密结合, 以无活性的形式存在. NF-κB激活受抑制蛋白IκB的调控, 外界信号可以通过κB激酶(IκB kinase, IKK)复合物活化IκB而激活NF-κB, NF-κB进入核内与靶基因κB部位结合, 调控特定基因转录^[34]. 硼替佐米(Bortezomib, Velcade)是一种蛋白酶体抑制剂, 能特异性抑制哺乳动物细胞内26S蛋白酶体的类胰凝乳蛋白酶(chymotrypsin-like)活性, 从而阻碍泛素-蛋白酶体通路对IκB的降解, 进而抑制NF-κB信号传导通路的活化, 最终达到促进细胞凋亡的作用. 多项研究表明硼替佐米对多种恶性肿瘤有明显的促凋亡作用^[35-37]. 在一项多中心的Ⅱ期临床研究中^[38], 采用了硼替佐米联合伊立替康治疗晚期胃癌的研究方案. 共37例晚期胃腺癌患者入组, 初治的晚期胃腺癌患者, 采用硼替佐米1.3 mg/m²第1, 4, 8, 11天静脉推注, 伊立替康125 mg/m²第1, 8天静脉推注, 3 wk重复; 复治患者, 给予硼替佐米单药治疗, 1.3 mg/m²第1, 4, 8, 11天静脉推注, 3 wk重复. 结果: 在29例可评价疗效的患者中, 联合组有效率为33%, 单药组有效率为9%. 联合组中位无进展生存时间(median progression-free survival)为1.8 mo, 单药组为1.4 mo, 联合组中位生存时间(median survival time)为4.8 mo, 单药组为5.4 mo, 副反应主要包括胃肠道反应、贫血、血小板减少等. 目前试验入组仍在进行, 最终的结果还有待于进一步观察.

4  基质金属蛋白酶抑制剂
MMPs是锌离子依赖的内分泌蛋白酶, 主要由体内单核细胞、组织中的巨噬细胞和相关的组织细胞等多种细胞分泌. 目前已发现的MMPs家族成员已达20多种, 许多生理及病理过程, 如炎症、组织纤维化、新血管形成和肿瘤的侵袭转移等都与MMPs的表达及活化有关. MMPs主要通过降解细胞外基质、调节细胞间黏附以及促进新血管的形成来影响肿瘤的侵袭与转移^[39]. MMP-2, MMP-7, MMP-9以及MMP-14在胃癌组织中都呈现过表达^[40-42], 其中MMP-2和MMP-9与胃癌细胞的浸润转移、血管生成及预后密切相关^[43]. 天然的MMPs抑制剂称“组织MMPs抑制剂”或TIMPs, 虽然已有相当多的临床前研究, 但还未成为治疗药物. 目前的研究集中于研制低分子量的合成MMPs抑制剂, 其中马立马司他(Marimastat, BB2516)是新一代人工合成的MMPI, 也是最早进入Ⅱ期临床试验的口服基质金属蛋白酶抑制剂.
        Marimastat是一类异羟酸衍生物, 其结构类似于间质组织胶原酶降解的胶原分子起始段, 能可逆的结合MMP含锌离子的活性区, 从而抑制其活性. Kimata et al^[44]采用胃癌TMK-1细胞系建立裸鼠腹膜荷瘤模型, 予以马立马司他(18 mg/kg·d)联合丝裂霉素(2 mg/kg)ip以及单独使用丝裂霉素(2 mg/kg)ip进行治疗试验. 结果显示: 联合用药组的腹膜播撒明显降低, 生存期明显延长. 在一项随机双盲安慰剂对照的临床研究中^[45], 369例无法手术的胃腺癌患者入组,